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细胞培养室无菌建设及注意事项

更新时间:2024-06-17      点击次数:99

细胞培养室无菌建设及注意事项如下:

一、无菌室建设

  1. 结构与布局:

    • 细胞培养室应包含更衣间、缓冲间和无菌操作间三个主要部分。

    • 更衣间:供实验人员更换衣服、鞋子及穿戴帽子、口罩和手套。

    • 缓冲间:位于更衣间与无菌操作间之间,用于放置恒温培养箱及某些小型仪器,同时确保无菌操作间的无菌环境。

    • 无菌操作间:专用于无菌操作和细胞培养。其大小应适当,顶部高度不超过2.5米,以保证紫外线的灭菌效果。墙壁应光滑不存在死角,便于清洁和消毒。

  2. 设备与设施:

    • 洁净工作台(超净台):是细胞培养中必需的设备,利用空气层流装置排除工作台面上的尘埃和微生物。主要有侧流式(垂直式)和外流式(水平层流式)两种。

    • CO₂培养箱:为细胞提供一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、CO₂浓度和湿度等。

    • 显微镜:用于观察细胞的生长情况和污染状况。

    • 其他:还包括超纯水机、单细胞悬液制备仪等设备。

二、注意事项

  1. 无菌操作:

    • 实验人员进入无菌室前,应先关掉紫外灯,至少等待15分钟后再进入。

    • 进入无菌室前,需用肥皂或消毒液洗手消毒,并在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套。

    • 实验过程中,应定期用消毒剂擦拭台面及操作台上的物品,保持工作区域的清洁和无菌。

  2. 材料准备:

    • 使用无菌的哺乳牛血清,并在低温下储存。

    • 使用新的、未污染的塑料制品和玻璃仪器。

    • 准备足够的消毒剂,如70%的乙醇、有效次氯酸钠等,并正确配制和使用。

  3. 通风与清洁:

    • 实验室应有良好的通风系统,确保空气流通和减少污染。

    • 定期清洁和消毒实验室环境,包括地面、墙壁、工作台等。

  4. 储藏与消毒:

    • 无菌物品应保存在无菌包或灭菌容器内,并按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内。

    • CO₂培养箱等设备应定期检查、清洗和消毒,以确保其无菌状态。

  5. 个人防护:

    • 实验人员应穿戴适当的个人防护装备,如手套、口罩等,以防止细菌或病毒的感染。

综上所述,细胞培养室的无菌建设及注意事项涉及多个方面,包括无菌室的结构与布局、设备与设施、无菌操作、材料准备、通风与清洁、储藏与消毒以及个人防护等。严格遵守这些要求和注意事项,可以确保细胞培养过程中的无菌环境,保障实验结果的准确性和可靠性。


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